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SERPINA3重組兔單克隆抗體




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ARTICLESSERPINA3重組兔單克隆抗體

| 應(yīng)用 | WB,IHC-P,IHC-F,IF | 英文名稱 | AACT Recombinant Rabbit mAb |
| 抗體來源 | Rabbit | 貨號 | YS-K6002 |
英文別名:AACT_HUMAN; SERPINA3; alpha-1-antichymotrypsin; ACT; Cell growth-inhibiting gene 24/25 protein; Serpin A3; GIG24; GIG25; serpin family A member 3;
交叉反應(yīng):Human
抗體來源:Rabbit
免疫原:Full length native Protein : 1-423/423
亞型:IgG
性狀:Lyophilized or Liquid
純化方法:affinity purified by Protein A
克隆類型:Recombinant
克隆號:A12D5
理論分子量:45 kDa
濃度:1mg/ml
儲存液:PBS, Glycerol, BSA.
研究領(lǐng)域:Cardiovascular > Blood > Serum Proteins
Cell Biology > Proteolysis / Ubiquitin > Proteolytic enzymes > Other proteases
Neuroscience > Neurology process > Neurodegenerative disease > Alzheimer's disease > Proteases

簡介:

α-1抗胰(SERPINA3,又稱α-1抗,A1ACT)是一種蛋白酶抑制劑(Serpin),屬于Serpin超家族成員,主要功能是抑制中性粒細胞彈性蛋白酶和肥大細胞類,參與炎癥調(diào)節(jié)和血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE1→ACE2)的轉(zhuǎn)化過程?。
產(chǎn)品特性:

?抗體類型?:重組兔單克隆抗體,通過基因工程技術(shù)制備,具有高特異性和低交叉反應(yīng)性?。
?應(yīng)用范圍?:適用于Western Blot(WB)、免疫組化(IHC)、免疫熒光(IF)等實驗,可檢測人、小鼠、大鼠等物種的SERPINA3蛋白表達?。
實驗方法:

1. ?樣本制備?
?組織樣本?:取新鮮組織(如肝、肺)或石蠟包埋組織,用PBS沖洗后勻漿,離心(12,000 rpm,10分鐘)取上清液?。
?細胞樣本?:培養(yǎng)細胞用消化后裂解(含蛋白酶抑制劑),離心后收集上清?。
2. ?抗體稀釋?
?推薦稀釋比例?:
Western Blot(WB):1:1000-1:5000(含1% BSA的TBS-Tween 20緩沖液)?。
免疫組化(IHC):1:200-1:1000(需抗原修復(fù))?。
3. ?Western Blot實驗步驟?
?電泳與轉(zhuǎn)膜?:SDS-PAGE分離蛋白后轉(zhuǎn)至PVDF膜,5%脫脂牛奶封閉1小時?。
?孵育抗體?:一抗4℃過夜,二抗(HRP標記)室溫1小時?。
?顯影?:ECL化學發(fā)光法檢測信號?。
4. ?免疫組化(IHC)?
?抗原修復(fù)?:石蠟切片經(jīng)檸檬酸鈉緩沖液(pH 6.0)高壓修復(fù)?。
?封閉與孵育?:3% H?O?滅活內(nèi)源酶,一抗4℃過夜?。
?顯色?:DAB顯色,蘇木精復(fù)染?。
操作方法及相關(guān)技術(shù)要點:

一、抗體制備流程
?免疫方案設(shè)計?
采用健康新西蘭白兔(2-3kg),以SERPINA3重組蛋白與弗氏佐劑(初免)或不佐劑(加強免疫)乳化后,通過皮下/肌肉注射免疫。抗原劑量為100-500μg/次,間隔2-4周加強免疫3-5次,通過ELISA監(jiān)測血清效價?。
?B細胞分離與單克隆化?
末次免疫后1-2周采集脾臟,研磨制備單細胞懸液,通過流式分選或有限稀釋法獲取特異性B細胞?。
采用單B細胞技術(shù)時,需通過RT-PCR擴增重/輕鏈可變區(qū)基因,并克隆至表達載體?。
二、抗體純化與鑒定
?表達與純化?
雜交瘤細胞或重組表達系統(tǒng)(如HEK293)培養(yǎng)后,通過蛋白A/G親和層析或離子交換層析純化抗體?。
聚乙二醇化修飾需檢測PEG殘留量及錯配異構(gòu)體(RP-UPLC法)。
?質(zhì)量控制?
?活性檢測?:ELISA法測定與SERPINA3抗原結(jié)合活性,EC50值需符合標準。
?純度分析?:SEC-HPLC檢測單體含量(>99%),CEX-HPLC分析電荷異質(zhì)性。
公司正在出售的產(chǎn)品:

| ABH5蛋白抗體 | 人皰疹病毒-7型感染IgG抗體(HHV-7 IgG)elisa定性檢測試劑盒 |
| ABI基因家族成員3結(jié)合蛋白抗體 | 人皰疹病毒-7型感染IgM抗體(HHV-7 IgM)elisa定性檢測試劑盒 |
| ADAMTS4抗體 | 人卡波氏肉瘤相關(guān)皰疹病毒(KSHV)elisa定性檢測試劑盒 |
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| Bcl-2同源拮抗劑抗體 | 人痢疾阿米巴(EIS)elisa定性檢測試劑盒 |
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